慢病毒濃縮試劑包括多個(gè)存儲(chǔ)模組，存儲(chǔ)模組包括固定座、設(shè)于固定座上的存放槽、設(shè)于存放槽底部的支撐臺(tái)、設(shè)于存放槽上側(cè)的位環(huán)；試劑管放置于存放槽內(nèi)；提高了試劑管在存儲(chǔ)以及運(yùn)輸過程中的穩(wěn)定性。通常用于實(shí)驗(yàn)室、產(chǎn)品研發(fā)部等地方，而有時(shí)在將攜帶有慢病毒的試劑管存儲(chǔ)在純化試劑盒內(nèi)后，需要將試劑盒運(yùn)輸至特定的區(qū)域內(nèi)，在存儲(chǔ)、運(yùn)輸?shù)倪^程中，目前的試劑盒容易出現(xiàn)試劑管傾倒或與試劑盒內(nèi)部產(chǎn)生碰撞的情況，進(jìn)而導(dǎo)致試劑管破裂，使得試劑管內(nèi)部的慢病毒溢出，進(jìn)而造成嚴(yán)重的污染，不利于試劑管的運(yùn)輸以及存儲(chǔ)。
 

　　慢病毒濃縮試劑使用說明：
 

　　1.收集慢病毒上清液，0.45um濾膜過濾，以除去細(xì)胞和碎片。
 

　　Note：如果使用濾膜過濾，只能使用低蛋白結(jié)合力的纖維素醋酸酯或聚醚堿(PES)膜。不能用硝酸纖維素膜(NC)。
 

　　2.將慢病毒上清與試劑盒中的濃縮液按照4：1的比例混合(上清液4份，濃縮液1份)，4C孵育2h或過夜。剛開始時(shí)每隔30min混勻一下，進(jìn)行3次。
 

　　Note：若時(shí)間不寬裕，可將孵育時(shí)間縮短為幾小時(shí)。慢病毒顆粒在4C可以穩(wěn)定保存數(shù)天。
 

　　3.于4℃，水平轉(zhuǎn)子4000g離心25min。
 

　　Note：角轉(zhuǎn)子會(huì)將病毒離心到管壁上，仔細(xì)分辨管壁上的白色沉淀并將其沖洗下來。
 

　　4.小心去除上清，不要晃動(dòng)管子，一般可見白色沉淀(有時(shí)沉淀不可見)。
 

　　5.用初始體積(原上清液體積)1/10-1/100的DMEM或PBS重懸病毒顆粒，小心吹打均勻，重懸沉淀物。
 

　　6.測(cè)定濃縮慢病毒樣品的滴度，50uL/管分裝，于-80C冰箱保存。
 

　　Note：慢病毒凍存液避免反復(fù)凍融，否則會(huì)降低病毒滴度。